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如何选择紫外可见光度计

紫外分光光度计已经是一种能解决广泛难题的仪器,从单一波长的测量到高性能多光谱的测量分析。实验室选择时需要根据自己实验室的需要和目的用途来考虑,光学构造和光源、探测方法和数据处理等都是要考虑的因素。

  • 光学构造

一般来说,紫外光分光光度计分为单光束和双光束两类。顾名思义,单光束型主要是依赖单束光进行测量。一束给定波长的光通过对照物,然后再通过实际样品溶液,就能得到吸光结果。

双光束型则是将一束光分成两束,分别测量对照样品和实际样品。可以最小化光漂移和减少测量时间。因为增加了测量的速度,所以双光束分光光度计在测量一些溶液随时间动态变化的研究中大有用处。

  • 光源和检测方法

分光光度计的光谱也是需要考虑的一个重要因素。实验室研究人员一般希望低价购入专门仪器定量核酸、蛋白或者细菌的生长情况。如果需要更大的灵活性,研究者可以考虑一种更高性能的宽光谱仪器,可以程序性地进行ELISAs分析和比色分析。

紫外分光光度计一般覆盖190nm380nm波长,通常利用氘灯照明。一些特殊的仪器可以提供满足光子学和半导体研究需要的光谱范围。

一些仪器具有多种光源供选择:紫外光、可见光和甚至红外光(780 nm 3,000 nm)。钨灯和卤素灯一般只覆盖可见光部分(大约380 nm 800 nm)。而氙灯则可以覆盖紫外光和可见光区域。

分光光度计的带宽很大程度上依赖于单色仪的狭缝的宽度。可以投射出实验精确要求的光谱。一种严格带宽使得仪器能对复杂的混合物进行高分辨率的吸光测量。可变的单色仪的狭缝宽度能使一台分光光度计满足多种实验需要。

为了测量吸光值,分光光度计通常使用光电倍增管和光敏二极管。光电倍增管提供快速的反应时间和良好的灵敏度,并且可以在紫外光谱调节至特定的范围。光敏二极管的动态范围可以在数秒内行使所有的光谱测量。

  • 数据管理

大部分单机型的分光光度计包含了驱动仪器运行和管理数据的软件。高性能的仪器,通常与PC机一起联用,同时用户也可以选择升级软件以满足他们的需要。


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